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关于赫澎
 赫澎生物是一家生物制剂,精细化工,基因科学等产品销售的企业。 公司主要产品包括生物试剂,标准品,培养基,检测试剂盒,多肽合成,仪器仪表等产品。
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  • 非蛋白质巯基含量检测试剂盒说明书   可见分光光度法
    注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
    规格:50T/24S
    产品内容:
    提取液一:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
    提取液二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
    试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 5mL 无水甲醇充分溶解备用。
    标准品:粉剂×1 支,10mg半胱氨酸,4℃保存。临用前加入 1.65mL 提取液溶解为 50µmol/ml 的半胱氨酸标准溶液。
    提取液的配制:将提取液一和提取液二按体积比 1:1 的比例混合配制,按照样本数量配制并在当天用完。
    产品说明:
    生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能, 对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。
    巯基基团与 5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在 412nm 处有最大吸收峰。
    自备实验用品:
    可见分光光度计、离心机、恒温水浴锅、1mL 玻璃比色皿、甲醇、研钵/匀浆器和蒸馏水。
    操作步骤:
    一、样品的制备
    1、 动物、植物组织:称取约 0.1g,加入 1mL 的提取液,制备成 10%的匀浆,10000g,常温离心
    10min,取上清待测。
    2、   细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL  提取液),超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min)然后 10000g,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。
    3、   血清(浆),培养液:向 0.1mL 血清(浆)或培养液中加入 1mL 提取液,10000g,常温离心10min,取上清待测。
    二、测定步骤
    1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 412nm,蒸馏水调零。
    2、将 50µmol/mL 标准溶液用提取液稀释至 0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125µmol/mL 的标准液,现用现配。
    3、操作表
     
    对照管
    测定管
    标准管
    空白管
    上清液(mL)
    0.3
    0.3
    -
    -
    标准品(mL)
    -
    -
    0.3
    -
    试剂一(mL)
    0.65
    0.65
    0.65
    0.65
    试剂二(mL)
    -
    0.1
    0.1
    -
    H2O(mL)
    0.1
     
     
    0.4
    混匀,室温放置 10min,测定 412nm 吸光值,分别记为 A 对照、A 测定、
    A 标准、A 空白,计算∆A 测定=A 测定-A 对照,算∆A 标准=A 标准-A 空白。
    三、计算公式
    1、 标准曲线的绘制:
    以标准液浓度为 x 轴,∆A 标准为 y 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将∆A 测定代入公式得到 x(µmol/mL)
    2、 非蛋白质巯基含量计算:
    (1) 按样本鲜重计算:
    非蛋白质巯基含量(µmol/g 鲜重)=x×V 提取÷W=x÷W
    (2) 按血清、培养液体积计算:
    非蛋白质巯基含量(µmol/mL)=x×(V 提取+V 液体)÷V 液体=1.1×x。
    (3) 按细胞数量计算:
    非蛋白质巯基含量(µmol/104 cell)=x×V 提取÷500=0.002×x。
    V 提取:加入提取液体积,1mL;W:样品质量,g;Cpr,样本蛋白浓度,mg/ml;500:500 万个细胞;V 液体:血清(浆)或培养液体积,0.1mL。
    注意事项:
    1、当吸光值大于 1.2 时,建议将上清液用提取液稀释后测定;吸光值过小时,建议提高样品质量或体积进行测定。
     
  • 菌种说明
     
    一 菌种简介
    菌种名称
    沼泽红假单胞菌
    规格
    冻干粉
    保存温度
    4-10℃
    二 保存条件
       斜面,穿刺菌和冻干粉应在4-10℃保存,甘油菌在-80℃保存。
     
    三 培养条件
    培养基
    见后面培养基配方
    培养温度
    25-30℃
    培养时间
    5-7天
    培养条件
    液体厌氧,40瓦乌丝灯下光照培养
     
    四 注意事项
    冻干粉首次活化,用0.3-0.5ml无菌水溶解,接种至10-20ml培养基中,培养液应加满至瓶盖处,每天转动位置使光照均匀,但不能强烈摇动。使用的试管应为螺纹口管并且密封性较好。
     
    1. 微生物菌种应保存于低温,清洁干燥的地方,室温时间放置过长会导致菌种衰退;
    2. 菌种操作在无菌条件下进行,接种完毕应该灭菌再做丢弃处理;
    3.  斜面和穿刺菌种保存时间通常3-6个月,应根据菌种状况及时结转;冻干粉保存时间通常2-25年;甘油菌保存时间2-5年。
     
    培养基:
    酵母粉  10.0g/L;    磷酸氢二钾 1.0g/L;  硫酸镁 0.5g/L。pH调节至7.0-7.2.121℃高压灭菌15min。
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