神经胶质(neuroglia),是广泛分布于中枢神经系统内的胶质细胞(glial cell或gliocyte),主要分成三大类型:大胶质细胞(macroglia)或星形细胞(astrocyte)、少突胶质细胞(oligodendrocyte)和小胶质细胞(microglia)。星形细胞又分为纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)和原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte)。神经胶质具有支持、滋养神经元的作用,预防神经冲动扩散的绝缘(insulator)作用,也有吸收和调节某些活性物质的功能。胶质细胞虽有突起,但不具轴突,也不产生动作电位。神经胶质细胞有分裂的能力,还能够吞噬因损伤而解体破碎的神经元,并能修复。原浆型星形细胞多见于灰质,突起不规则,分支多而短曲;纤维型星形细胞分布于白质内,呈放射状,细长而直,分支少,表面光滑;少突胶质细胞分布于灰质及白质内,突起比其他胶质细胞少而短,呈圆形或椭圆形,染色稍深;小胶质细胞分布于灰质及白质内,体小致密,呈长形。使用特殊银染方法才能显示神经胶质细胞形态,例如郝特卡(Del Rio-Hortega)发明了神经胶质碳酸氨(silver carbonate)黑色反应的浸银(impregnation)染色,获得小胶质细胞的染色效果。
产品内容
固着液(Reagent A) 毫升
清理液(Reagent B) 毫升
脱蜡液(Reagent C) 毫升(自备)
补水液A(Reagent D) 毫升
补水液B(Reagent E) 毫升
补水液C(Reagent F) 毫升
染色液(Reagent G) 毫升
还原液(Reagent H) 毫升
稳定液(Reagent I) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent G) 在室温下,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证3月
用户自备
无菌手术刀和镊子:用于解剖动物脑组织
小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器
切片机:用于组织切片
明胶化载玻片和盖玻片:用于切片后铺片
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
实验步骤
一、 样本固着处理
1. 常规麻醉动物和手术(建议:使用生理盐水由心脏处灌注三次,每次60毫升,去除血液直至澄清)
2. 使用适量的固着液(Reagent A)灌注处理
3. 即刻小心取出脑组织
4. 小心放进到xx毫升固着液(Reagent A)里
5. 室温下浸泡孵育2天
6. 即刻用无菌镊子夹起组织块
7. 小心转移到xx毫升清理液(Reagent B)里
8. 室温下浸泡孵育2分钟
9. 用绵纸吸干组织快
10. 即刻进行常规30%蔗糖脱水和石蜡处理后包埋
11. 取出组织块,进行缓慢石蜡切片,为20至100微米厚,并铺片在明胶化载玻片上
二、 脱蜡处理
1. 取出10片待测的20至100微米厚的石蜡包埋的组织切片
2. 放进80℃烘箱,孵育30分钟
3. 室温下静置15分钟
4. 按下表依次放进小染色缸里孵育
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent B)
三、 样本染色处理
1. 小心加上xx微升 染色液(Reagent G),铺满整个切片样品表面
2. 室温下孵育5分钟,或直至呈现黑色,即刻终止,避免光照
3. 小心移去染色液
4. 小心加上xx微升 还原液(Reagent H),铺满整个切片样品表面
5. 室温下孵育5分钟
6. 小心移去还原液
7. 加上xx微升清理液(Reagent B)
8. 即刻移去清理液
9. 小心加上xx微升 稳定液(Reagent I),铺满整个切片样品表面
10. 室温下孵育5分钟
11. 小心移去稳定液
12. 透明处理
13. 放上盖玻片或封片(中性树脂)
14. 即刻在一般光学显微镜下观察: 小胶质细胞呈现黑色
产品内容
固着液(Reagent A) 毫升
清理液(Reagent B) 毫升
脱蜡液(Reagent C) 毫升(自备)
补水液A(Reagent D) 毫升
补水液B(Reagent E) 毫升
补水液C(Reagent F) 毫升
染色液(Reagent G) 毫升
还原液(Reagent H) 毫升
稳定液(Reagent I) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存染色液(Reagent G) 在室温下,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证3月
用户自备
无菌手术刀和镊子:用于解剖动物脑组织
小型玻璃染色缸:用于组织或切片处理的容器
切片机:用于组织切片
明胶化载玻片和盖玻片:用于切片后铺片
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
实验步骤
一、 样本固着处理
1. 常规麻醉动物和手术(建议:使用生理盐水由心脏处灌注三次,每次60毫升,去除血液直至澄清)
2. 使用适量的固着液(Reagent A)灌注处理
3. 即刻小心取出脑组织
4. 小心放进到xx毫升固着液(Reagent A)里
5. 室温下浸泡孵育2天
6. 即刻用无菌镊子夹起组织块
7. 小心转移到xx毫升清理液(Reagent B)里
8. 室温下浸泡孵育2分钟
9. 用绵纸吸干组织快
10. 即刻进行常规30%蔗糖脱水和石蜡处理后包埋
11. 取出组织块,进行缓慢石蜡切片,为20至100微米厚,并铺片在明胶化载玻片上
二、 脱蜡处理
1. 取出10片待测的20至100微米厚的石蜡包埋的组织切片
2. 放进80℃烘箱,孵育30分钟
3. 室温下静置15分钟
4. 按下表依次放进小染色缸里孵育
| 染色缸 | 孵育时间 |
| xx毫升脱蜡液(Reagent C) | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液(Reagent C) | 15分钟 |
| xx毫升脱蜡液(Reagent C) | 15分钟 |
| xx毫升补水液A(Reagent D) | 3分钟 |
| xx毫升补水液B(Reagent E) | 3分钟 |
| xx毫升补水液C(Reagent F) | 3分钟 |
| xx毫升清理液(Reagent B) | 3分钟 |
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent B)
三、 样本染色处理
1. 小心加上xx微升 染色液(Reagent G),铺满整个切片样品表面
2. 室温下孵育5分钟,或直至呈现黑色,即刻终止,避免光照
3. 小心移去染色液
4. 小心加上xx微升 还原液(Reagent H),铺满整个切片样品表面
5. 室温下孵育5分钟
6. 小心移去还原液
7. 加上xx微升清理液(Reagent B)
8. 即刻移去清理液
9. 小心加上xx微升 稳定液(Reagent I),铺满整个切片样品表面
10. 室温下孵育5分钟
11. 小心移去稳定液
12. 透明处理
13. 放上盖玻片或封片(中性树脂)
14. 即刻在一般光学显微镜下观察: 小胶质细胞呈现黑色


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