作为RNA染色剂之一的RiboGreen荧光染料与样品中RNA，包括rRNA、mRNA等结合，产生荧光信号。RiboGreen可以检测到低达1纳克RNA的变化。RNA的微量增加引起荧光信号强度（Intensity）或相对荧光单位（RFU）的显著增加。其自发荧光（Autofluorescence）忽略不计，重复性标准差异（Standard Deviation）低，不受样品化学成分的干扰。
 
产品内容
 
HEPENGBIO染色液（Reagent A）     微升
HEPENGBIO稀释液（Reagent B）     毫升
HEPENGBIO标准液（Reagent C）          微升
产品说明书                         1份
 
保存方式
 
保存HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO标准液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里，HEPENGBIO染色液（Reagent A）避免光照，有效保证6月
 
用户自备
 
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
200微升1厘米光径比色皿或黑色96孔板：用于荧光分析的容器
荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于荧光定量分析
 
实验步骤
 
一、 测定准备
 
1． 准备好待测样品，置于冰槽里
2． 设定好荧光分光光度仪：激发波长485±10nm，散发波长530±12.5nm，并置零
3． 实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的HEPENGBIO染色液（Reagent A）置于冰槽里融化。然后移出xx微升HEPENGBIO稀释液（Reagent B）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升HEPENGBIO染色液（Reagent A），混匀后，用锡纸包裹，标记为HEPENGBIO染色工作液（5次测定量），放在暗室里。然后进行下列操作。
 
二、 构建标准曲线
 
1． 准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管
2． 分别加入xx微升HEPENGBIO稀释液（Reagent B）到每个离心管
3． 移取xx微升HEPENGBIO标准液（Reagent C）到1号管，混匀
4． 小心移取xx微升1号管稀释的HEPENGBIO标准液（Reagent C）到2号管，混匀
5． 小心移取xx微升2号管稀释的HEPENGBIO标准液（Reagent C）到3号管，混匀
6． 小心移取xx微升3号管稀释的HEPENGBIO标准液（Reagent C）到4号管，混匀
7． 将1至5号管放进冰槽里备用；标准管含量见下表
 

管号	HEPENGBIO稀释液（Reagent B）	HEPENGBIO标准液（Reagent C）	标准DNA总量
1	xx微升	xx微升	xx纳克/毫升
2	xx微升	xx微升1号管	xx纳克/毫升
3	xx微升	xx微升2号管	xx纳克/毫升
4	xx微升	xx微升3号管	xx纳克/毫升
5	xx微升	空对照	0

 
8． 移取xx微升含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO稀释液（Reagent B）的HEPENGBIO染色工作液到新的比色皿
9． 加入100微升上述配制的标准液
10． 室温下，孵育5分钟，避免光照
11． 即刻放进荧光分光光度仪测读：获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
12． 重复实验步骤8至11四次
13． 绘制标准曲线：纵座标（Y轴）为相对荧光单位（RLU）；横坐标（X轴）为DNA含量（纳克/毫升）
 
三、 样品检测
 
1． 移取xx微升含有HEPENGBIO染色液（Reagent A）和HEPENGBIO稀释液（Reagent B）的HEPENGBIO染色工作液到新的比色皿
2． 加入100微升待测样品
3． 室温下，孵育5分钟，避免光照
4． 即刻放进荧光分光光度仪测读：获得相对荧光单位（Relative Fluorescence Unit；RFU）
5． 根据标准曲线获得样品对应RNA含量（纳克/毫升）