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突触体（synaptosome），又称为纯化的神经末端（nerve terminals），源自于神经轴突（axons）和突触后连接（postsynaptic connections），内含有细胞浆、突触囊泡（synaptic vesicle；SV）、突触后致密区（postsynaptic density；PSD）、线粒体和细胞骨架等结构，其具有生产ATP，具备功能性离子通道、载体和受体，维持膜电位和离子内平衡、摄取和释放神经传导介质（neurotransmitters），胞饮（endosytosis）等功能。突触体成为脑组织中突触功能分子机制研究的模型系统，以提供足够的蛋白生化材料，识别主要的神经传导介质及其代谢活性、摄取和释放机制，发现突触传导调节信号通路，包括学习、记忆、感觉整合、运动调度和情绪反应等，研究突触功能异常与衰老和神经性疾病的相关性。突触体细胞器的分离是现代细胞生物学研究的最常用的手段之一。从脑组织或神经细胞分离突触体的方法基本上采用：第一，通过机械方法破裂组织细胞；第二，通过低速差速离心去除残渣碎屑、巨大细胞器（细胞核），剥离神经末端部分，且重新封口，形成膜性液囊（sac）；第三，通过高速差速离心获得突触体、质膜、髓磷脂（myelin）、内质网、突触体外线粒体；甚至第四，可以通过等密度离心获得纯度更高的突触体，去除髓磷脂（myelin）和突触体外线粒体等。
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO裂解液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO保存液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO裂解液（Reagent B）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
HANK平衡盐缓冲溶液（HEPENGBIO12028）或PBS缓冲溶液（HEPENGBIO12033）：用于清理细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（HEPENGBIO12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（HEPENGBIO12052）：用于细胞处理所需的培养基
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
4℃台式离心机：用于样品操作
4℃超速离心机：用于样品操作
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织细胞
实验步骤
一、 组织突触体分离
1． 手术取出动物脑组织，并秤重以确定1克组织重量
2． （选择步骤）放进预冷的50毫升锥形离心管
3． （选择步骤）加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎组织
5． 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6． 加入xx毫升预冷的HEPENGBIO裂解液（Reagent B）
7． 涡旋震荡5秒，充分混匀
8． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
9． 在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约20至40下）（注意：参见注意事项8）
10． 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
11． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1000g
12． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞
13． 放进4℃超速离心机离心30分钟，速度为15000g
14． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得突触体沉淀物
15． （选择步骤）加入xx毫升预冷的HEPENGBIO保存液（Reagent C）
16． （选择步骤）放进4℃超速离心机再次离心15分钟，速度为15000g
17． （选择步骤）小心抽去上清液
18． 加入xx毫升HEPENGBIO保存液（Reagent C），充分混匀
19． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里
二、细胞突触体分离
1． 准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞（5 X 107），直至细胞生长铺满整个培养表面
2． 分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面，然后抽去
3． 重复实验步骤2一次
4． 加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个细胞生长表面
5． 置入37℃培养箱3分种
6． 轻轻手击震动培养瓶，使细胞脱落，
7． 分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液
8． 移入一个50毫升锥形离心管
9． 放进台式离心机离心10分钟，速度为200g
10． 小心抽去上清液
11． 加入xx毫升预冷的HEPENGBIO清理液（Reagent A），混匀细胞
12． 放进台式离心机离心10分钟，速度为300g
13． 小心抽去上清液
14． 加入xx毫升预冷的HEPENGBIO裂解液（Reagent B）
15． 涡旋震荡5秒，充分混匀细胞颗粒群
16． 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器
17． 在冰槽里用匀浆棒匀化细胞（约20至40下）（注意：参见注意事项8）
18． 将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管
19． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1000g
20． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞
21． 放进4℃超速离心机离心30分钟，速度为15000g
22． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得突触体沉淀物
23． （选择步骤）加入xx毫升预冷的HEPENGBIO保存液（Reagent C）
24． （选择步骤）放进4℃超速离心机再次离心15分钟，速度为15000g
25． （选择步骤）小心抽去上清液
26． 加入xx毫升HEPENGBIO保存液（Reagent C），充分混匀
27． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO裂解液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO保存液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO裂解液（Reagent B）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月
用户自备
HANK平衡盐缓冲溶液（HEPENGBIO12028）或PBS缓冲溶液（HEPENGBIO12033）：用于清理细胞
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液（HEPENGBIO12024）：用于细胞脱离
完全细胞培养液（HEPENGBIO12052）：用于细胞处理所需的培养基
15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
50毫升锥形离心管：用于样品操作的容器
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
4℃台式离心机：用于样品操作
4℃超速离心机：用于样品操作
DOUNCE匀浆器：用于裂解组织细胞
实验步骤
一、 组织突触体分离
1． 手术取出动物脑组织，并秤重以确定1克组织重量
2． （选择步骤）放进预冷的50毫升锥形离心管
3． （选择步骤）加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎组织
5． 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6． 加入xx毫升预冷的HEPENGBIO裂解液（Reagent B）
7． 涡旋震荡5秒，充分混匀
8． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器
9． 在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约20至40下）（注意：参见注意事项8）
10． 将所有组织匀浆物移入15毫升锥形离心管
11． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1000g
12． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞
13． 放进4℃超速离心机离心30分钟，速度为15000g
14． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得突触体沉淀物
15． （选择步骤）加入xx毫升预冷的HEPENGBIO保存液（Reagent C）
16． （选择步骤）放进4℃超速离心机再次离心15分钟，速度为15000g
17． （选择步骤）小心抽去上清液
18． 加入xx毫升HEPENGBIO保存液（Reagent C），充分混匀
19． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里
二、细胞突触体分离
1． 准备5至10瓶75cm2细胞培养瓶的细胞（5 X 107），直至细胞生长铺满整个培养表面
2． 分别加入10毫升用户自备的HANK平衡盐缓冲溶液或PBS缓冲溶液到每个细胞培养瓶，覆盖培养瓶表面，然后抽去
3． 重复实验步骤2一次
4． 加入3毫升用户自备的胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液，铺满整个细胞生长表面
5． 置入37℃培养箱3分种
6． 轻轻手击震动培养瓶，使细胞脱落，
7． 分别加入10毫升用户自备的完全细胞培养液
8． 移入一个50毫升锥形离心管
9． 放进台式离心机离心10分钟，速度为200g
10． 小心抽去上清液
11． 加入xx毫升预冷的HEPENGBIO清理液（Reagent A），混匀细胞
12． 放进台式离心机离心10分钟，速度为300g
13． 小心抽去上清液
14． 加入xx毫升预冷的HEPENGBIO裂解液（Reagent B）
15． 涡旋震荡5秒，充分混匀细胞颗粒群
16． 即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器
17． 在冰槽里用匀浆棒匀化细胞（约20至40下）（注意：参见注意事项8）
18． 将所有细胞匀浆物移入15毫升锥形离心管
19． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为1000g
20． 小心移出上清液到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管——此步骤去除细胞核和未溶解的细胞
21． 放进4℃超速离心机离心30分钟，速度为15000g
22． 小心抽去上清液，保留沉淀颗粒——此步骤获得突触体沉淀物
23． （选择步骤）加入xx毫升预冷的HEPENGBIO保存液（Reagent C）
24． （选择步骤）放进4℃超速离心机再次离心15分钟，速度为15000g
25． （选择步骤）小心抽去上清液
26． 加入xx毫升HEPENGBIO保存液（Reagent C），充分混匀
27． 即刻移入1.5毫升离心管，放进－70℃冰箱里
