甘薯长喙壳菌（Ceratocystis fimbriata），是一种分布广泛、危害多种木本和草本植物的真菌病原体，为深棕绿色，其最初在甘薯上发现。甘薯长喙壳菌属于囊菌亚门（aseomycotina）、核菌纲（pyrenomycetes）、小囊菌目（microascales）、长喙壳科（ceratocystiaceae）。其主要寄宿包括甘薯、可可、咖啡、橡胶、芒果、桉树、杨树、刺桐、山胡桃、枫树、石榴、刺槐、柑橘类、李属植物等草本植物，以及木薯、芋头、山扁头、菽麻等草本植物。甘薯长喙壳菌具有复杂的多种属，宿主和地域分布特殊性。甘薯长喙壳菌通过昆虫、水源、土壤等传播并感染创伤的植物，导致脉管或木质深棕红色至黑色色斑、溃烂（kanker）、创伤蔓延、树叶凋谢（wilting）等病理症状。基于核糖体DNA（ribosomal DNA；rDNA）上内转录间隔区（Internal Transcribed Spacer；ITS）的变异区（variable region）在甘薯长喙壳菌中高度保留，以此作为甘薯长喙壳菌的分子标记。通过引物设计，扩增产物，在凝胶电泳上呈现特异性条带，或进一步测序，数据库对照，确定甘薯长喙壳菌种系（species）。  
 
产品内容
 
HEPENGBIO扩增液（Reagent A） 600微升
HEPENGBIO引物液（Reagent B）  40微升
HEPENGBIO补充液（Reagent C）   1毫升
产品说明书   1份
 
保存方式
 
保存在－20℃冰箱里；有效保证6月
 
用户自备
 
PCR级矿物油：用于封隔反应液
PCR仪：用于样品扩增
PCR管或平板：用于PCR反应的容器
琼脂糖凝胶电泳：用于扩增后电泳分析
 
实验步骤
 
实验开始前，从－20℃冰箱中取出试剂，放进冰槽里融化。然后进行下列操作：
 
1． 针对一个样本，每次移出30微升HEPENGBIO扩增液（Reagent A）到PCR管
2． 加入2微升用户自备的的待测DNA样品（总量100纳克）
3． 加入2微升HEPENGBIO引物液（Reagent B）
4． 再加入16微升HEPENGBIO补充液（Reagent C）（反应总量为50微升）
5． 即刻放进微型台式离心机瞬时离心5秒
6． （选择步骤）加入50微升用户自备的PCR级矿物油（注意：参见注意事项12）
7． 即刻进行热启动PCR反应：
 

温度（℃）	时间	循环
95	2分钟	1
95 66 72	30秒钟 1分钟 30秒钟	38
72	10分钟	1

 
8． 反应完毕后，移取5微升进行1.5%琼脂糖凝胶电泳：产物为181bp