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阳离子荧光羰花青染色剂JC-1（5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocyanine iodide）是一种对膜电位高度敏感的染色剂。它特异性地进入线粒体，分布和结合在线粒体基质上。线粒体膜电位的高低变化决定了JC-1的分布浓度。电位高，JC-1形成聚集体，而浓度高，荧光显色为红色或桔红色；反之， 则为绿色。荧光减弱表明线粒体内膜功能受到损害。
产品内容
HEPENGBIO 染色液（Reagent A） 微升
HEPENGBIO 稀释液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO 清理液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1 份
保存方式
保存 HEPENGBIO 清理液（Reagent C）在 4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里；HEPENGBIO 染色液
（Reagent A）避免光照；有效保证 6 月
用户自备
1.5 毫升离心管：用于工作液配制的容器培养箱：用于染色孵育
（共聚焦）荧光显微镜：用于冰冻切片组织细胞线粒体荧光定性分析
实验步骤
实验开始前， 将－ 20℃冰箱里的试剂盒中的 HEPENGBIO 染色液（ Reagent A） 置入冰槽里融化， HEPENGBIO 稀释液（Reagent B）放进 37℃恒温水槽里预热。然后移出 xx 微升 HEPENGBIO 染色液
（Reagent A）到新的 1.5 毫升离心管，加入 xx 微升 HEPENGBIO 稀释液（Reagent B），混匀后，在冰槽
里静置，并标记为 HEPENGBIO 染色工作液，放在暗室里。然后进行下列操作。
1. 准备 5 片待测的厚为 10 微米的未经固着处理的冰冻切片
2. 置于室温下，小心加上 xx 微升预冷的 HEPENGBIO 清理液（Reagent C），铺满整个切片表面
3. 小心移去切片上的 HEPENGBIO 清理液（Reagent C）
4. 小心加上 xx 微升室温预热的 HEPENGBIO 染色工作液，铺满整个切片表面
5. 在 37℃湿润培养箱里，孵育 20 分钟（注意：避免液体蒸发）
6. 小心移去切片上的 HEPENGBIO 染色工作液，避免光照
7. 小心加上 xx 微升 HEPENGBIO 清理液（Reagent C），铺满整个切片表面
8. 小心移去切片上的 HEPENGBIO 清理液（Reagent C）
9. 放上盖玻片或封片（注意：检测前置于冰槽里）
10. 即刻在倒置荧光显微镜下进行观察（单滤波或双滤波）：
观察红色荧光：滤波器激发波长 490nm，散发波长 590nm 或罗丹明（rhodamine）滤波器激发波长 540nm， 散发波长 570nm 或德州红（Texas Red）滤波器激发波长 590nm，散发波长 610nm――可见
亮红色荧光；如果强度显著减弱，表明线粒体膜电位受到破坏
观察绿色荧光：滤波器激发波长 490nm，散发波长 530nm 或荧光素（Fluorescein）滤波器激发波长 490nm， 散发波长 520nm――如果绿色荧光强度显著增强，表明线粒体膜电位受到破坏，未结合 JC
－1 染料在细胞浆里
