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细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。其原理是细菌处于 0℃，在脉冲电场作用下，感应电荷的细胞膜暂时出现微孔，其结果是细胞内外分子交换显著增加，促进细胞吸收DNA复合物，以及各种药物、蛋白质和其它大分子等。电场取消后微孔关闭而不会对细胞造成任何影响。产品内容
HEPENGBIO 培养液（Reagent A） 毫升HEPENGBIO 宿主液（Reagent B） 微升
HEPENGBIO 调理液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1 份
保存方式
保存 HEPENGBIO 宿主液（Reagent B）在－70℃冰箱里，其余的保存在 4℃冰箱里，有效保证 6 月
用户自备
250 毫升玻璃烧瓶：用于操作的容器
4℃台式离心机：用于沉淀细菌
50 毫升锥形离心管：用于操作的容器
1.5 毫升离心管：用于保存感受态细胞恒温摇床：用于培养细菌
实验步骤
1. 准备 1 个 50 毫升锥形离心管
2. 加入xx 毫升 HEPENGBIO 培养液（Reagent A）
3. 加入xx 微升 HEPENGBIO 宿主液（Reagent B）
4. 放进 37℃恒温摇床孵育过夜，速度为 200RPM
5. 准备 2 个 250 毫升无菌烧瓶，分别加入xx 毫升 37℃预热的 HEPENGBIO 培养液（Reagent A）
6. 分别移出xx 微升上述菌液到含有 HEPENGBIO 培养液（Reagent A）的 250 毫升无菌烧瓶
7. 放进 37℃恒温摇床孵育 5 小时，速度为 200RPM，直至 OD550＝0.8
8. 分别移出 45 毫升新鲜菌液到 4 个新的 50 毫升锥形离心管
9. 放进冰槽里孵育 60 分钟
10. 放进 4℃台式离心机离心 10 分钟，速度为 2600g
1. 小心抽去上清液
12. 分别加入xx 毫升预冷的 HEPENGBIO 调理液（Reagent C），充分混匀
13. 放进 4℃台式离心机离心 30 分钟，速度为 2600g
14. 小心抽掉上清液
15. 重复实验步骤 12 至 13 一次
16. 小心抽去 40 毫升上清液，保留 5 毫升上清液
17. 合并到 1 个 50 毫升锥形离心管
18. 放进 4℃台式离心机离心 10 分钟，速度为 2600g
19. 小心抽去 19 毫升上清液，保留 1 毫升上清液
20. 混匀细胞颗粒群
21. 即刻分别移入 20 微升上述菌液分装到预冷的 1.5 毫升离心管（50 管）
2. 即刻放进－70℃冰箱保存备用
