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抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate resistant acid phosphatase；TRAP）是一种在哺乳动物内表达的糖化单体金属蛋白酶，970多碱基，320多氨基酸，分子量为35kD。作为破骨细胞的标志，抗酒石酸酸性磷酸酶与破骨细胞调节的骨再吸收（resorption）活性和骨生成代谢有关。抗酒石酸酸性磷酸酶是以酶原形式合成，通过蛋白酶裂解和还原后活化。在酸性环境下，催化磷酸酯键的水解，产生醇和释放磷酸。其特征性为酒石酸抗性而与其它酸性磷酸酶区别。抗酒石酸酸性磷酸酶在破骨细胞（osteoclast）、活化的巨噬细胞、神经细胞以及怀孕期的猪内皮层子宫内膜（endometrium）高度表达。在网状内皮组织增殖（leukaemic reticuloendotheliosis）或毛细胞性白血病（hairy cell leukaemia）、戈谢病（Gaucher’s disease）、爱兹性脑病（HIV-induced encephalopathy）、骨巨细胞瘤（osteoclastoma）、骨质疏松症（osteoporosis）和代谢性骨病等病人体内抗酒石酸酸性磷酸酶显著增高。 通过抗酒石酸酸性磷酸酶多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗（Peroxidase conjugated antibody）反应，进而使用染料二氨基联苯胺染色显示抗酒石酸酸性磷酸酶表达阳性破骨细胞为棕褐色。
产品内容
HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A） 300毫升（自备）
HEPENGBIO补水液A（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO补水液B（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO补水液C（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO补水液D（Reagent E） 毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent F） 毫升
HEPENGBIO修复液（Reagent G） 毫升
HEPENGBIO封阻液（Reagent H） 毫升
HEPENGBIO一抗液（Reagent I） 毫升
HEPENGBIO二抗液（Reagent J） 毫升
HEPENGBIO显色液A（Reagent K） 微升
HEPENGBIO显色液B（Reagent L） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO修复液（Reagent G）、HEPENGBIO一抗液（Reagent I）、HEPENGBIO二抗液（Reagent J）和HEPENGBIO显色液A（Reagent K）在－20℃冰箱里，严格避免反复冻融，其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO二抗液（Reagent J）和HEPENGBIO显色液A（Reagent K），避免光照；有效保证3月
用户自备
小型染色缸：用于石蜡切片的脱蜡和染色操作
盖玻片：用于抗体孵育操作
光学显微镜：用于细胞染色后观察分析
特别注意
1． HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）必须在实验操作前即刻混匀；混匀后切忌久放不用或储存后备用；用完扔掉
2． HEPENGBIO显色液A（Reagent K）如果出现沉淀，须过滤后再用
实验步骤
一、 脱蜡处理
1． 取出10片4至10微米厚的待测石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）
2． （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟
3． （选择步骤）室温下静置15分钟
4． 按下表依次放进小染色缸里孵育
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液D（Reagent E）
6． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5分钟
小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
二、样本修复处理
1． 小心加上xx微升HEPENGBIO修复液（Reagent G），铺满整个切片样品表面
2． 室温下孵育5分钟
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO修复液（Reagent G）
4． 室温下，将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育5分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
6． 小心加上xx微升HEPENGBIO封阻液（Reagent H），铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育30分钟
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO封阻液（Reagent H）
9． 室温下，将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育5分钟
10． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
三、 免疫标记处理
1． 小心加上xx微升含有HEPENGBIO一抗液（Reagent I），铺满整个切片样品表面
2． 室温下，孵育1小时，保持湿润，避免干燥（注意：可以使用盖玻片盖上孵育）
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO一抗液（Reagent I）
4． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
四、样本染色处理
在染色前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的HEPENGBIO显色液A（Reagent K）置入冰槽里融化，然后移取xx微升HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和1.8毫升HEPENGBIO显色液B（Reagent L）到2毫升离心管，充分混匀，标记为HEPENGBIO显色工作液，置于暗室。然后进行下列操作：
1． 小心加上xx微升HEPENGBIO二抗液（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以使用盖玻片盖上孵育）
2． 室温下孵育30分钟，避免光照
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO二抗液（Reagent J）
4． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
6． 小心加上xx微升含有HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）的HEPENGBIO显色工作液，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5至60分钟，或直至样本出现棕褐色
8． 小心移去切片上含有HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）的HEPENGBIO显色工作液
9． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中浸泡5秒
10． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
11． （选择步骤）进行甲基绿或苏木素复染（注意：建议使用HEPENGBIO甲基绿复染试剂盒－ ）
12． 放上盖玻片或封片
13． 即刻在一般光学显微镜下观察：阳性细胞呈现棕褐色
产品内容
HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A） 300毫升（自备）
HEPENGBIO补水液A（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO补水液B（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO补水液C（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO补水液D（Reagent E） 毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent F） 毫升
HEPENGBIO修复液（Reagent G） 毫升
HEPENGBIO封阻液（Reagent H） 毫升
HEPENGBIO一抗液（Reagent I） 毫升
HEPENGBIO二抗液（Reagent J） 毫升
HEPENGBIO显色液A（Reagent K） 微升
HEPENGBIO显色液B（Reagent L） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO修复液（Reagent G）、HEPENGBIO一抗液（Reagent I）、HEPENGBIO二抗液（Reagent J）和HEPENGBIO显色液A（Reagent K）在－20℃冰箱里，严格避免反复冻融，其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO二抗液（Reagent J）和HEPENGBIO显色液A（Reagent K），避免光照；有效保证3月
用户自备
小型染色缸：用于石蜡切片的脱蜡和染色操作
盖玻片：用于抗体孵育操作
光学显微镜：用于细胞染色后观察分析
特别注意
1． HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）必须在实验操作前即刻混匀；混匀后切忌久放不用或储存后备用；用完扔掉
2． HEPENGBIO显色液A（Reagent K）如果出现沉淀，须过滤后再用
实验步骤
一、 脱蜡处理
1． 取出10片4至10微米厚的待测石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）
2． （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟
3． （选择步骤）室温下静置15分钟
4． 按下表依次放进小染色缸里孵育
| 染色缸 | 孵育时间 |
| xx毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A） | 15分钟 |
| xx毫升HEPENGBIO补水液A（Reagent B） | 3分钟 |
| xx毫升HEPENGBIO补水液B（Reagent C） | 3分钟 |
| xx毫升HEPENGBIO补水液C（Reagent D） | 3分钟 |
| xx毫升HEPENGBIO补水液D（Reagent E） | 3分钟 |
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液D（Reagent E）
6． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5分钟
小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
二、样本修复处理
1． 小心加上xx微升HEPENGBIO修复液（Reagent G），铺满整个切片样品表面
2． 室温下孵育5分钟
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO修复液（Reagent G）
4． 室温下，将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育5分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
6． 小心加上xx微升HEPENGBIO封阻液（Reagent H），铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育30分钟
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO封阻液（Reagent H）
9． 室温下，将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育5分钟
10． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
三、 免疫标记处理
1． 小心加上xx微升含有HEPENGBIO一抗液（Reagent I），铺满整个切片样品表面
2． 室温下，孵育1小时，保持湿润，避免干燥（注意：可以使用盖玻片盖上孵育）
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO一抗液（Reagent I）
4． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
四、样本染色处理
在染色前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的HEPENGBIO显色液A（Reagent K）置入冰槽里融化，然后移取xx微升HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和1.8毫升HEPENGBIO显色液B（Reagent L）到2毫升离心管，充分混匀，标记为HEPENGBIO显色工作液，置于暗室。然后进行下列操作：
1． 小心加上xx微升HEPENGBIO二抗液（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以使用盖玻片盖上孵育）
2． 室温下孵育30分钟，避免光照
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO二抗液（Reagent J）
4． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
6． 小心加上xx微升含有HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）的HEPENGBIO显色工作液，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5至60分钟，或直至样本出现棕褐色
8． 小心移去切片上含有HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）的HEPENGBIO显色工作液
9． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中浸泡5秒
10． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
11． （选择步骤）进行甲基绿或苏木素复染（注意：建议使用HEPENGBIO甲基绿复染试剂盒－ ）
12． 放上盖玻片或封片
13． 即刻在一般光学显微镜下观察：阳性细胞呈现棕褐色
