肌酐(creatinine)是肌肉收缩后磷酸肌酸的分解产物或者是肌肉、神经中肌酸脱水后产生,也是肌酸的环状衍生物。肌酐通过血液由肾脏过滤出来,经过尿液排泄。一旦肾脏功能缺失,血液中肌酐水平显著增高。因此,血液和尿液的肌酐水平可以测算肌酐清除能力(creatinine clearance;CrCl),从而评价肾小球滤过率(glomerular filtration rate;GFR),反映肾功能。正常情况下,肌肉发达的人肌酐水平相对较高,而素食者肌酐水平较低。肌酐水平异常增高与肾脏损害(renal impairment)、肾炎(Nephritis)、肾病、尿路梗阻、汞中毒(mercurialism)等有关;异常降低则与青少年糖尿病、怀孕和肌萎缩等有关。酶连续循环反应检测肌酐较之化学方法具有更简便(无需预处理)、更准确(干扰性低)、高通量的优点。基于肌酐,在碱性环境下,与苦味酸(picric acid)反应(Jaffe 反应),产生还原性桔红色复合物,通过其终点吸收峰值的变化(492nm波长),来定量分析肌酐的含量。其反应系统如下:
 
                              
产品内容
 
HEPENGBIO反应液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO碱性液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO标准液(Reagent C) 微升
产品说明书 1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反应液(Reagent A)避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月
 
用户自备
 
恒温培养箱:用于反应孵育
比色皿:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
 
实验步骤
 
一、测定准备
 
1. 准备好待测样品,置于冰槽里
2. 设定好分光光度仪(温度为37℃):波长492nm,并置零
 
二、 样品测定
 
1. 移取xx微升HEPENGBIO反应液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升HEPENGBIO碱性液(Reagent B),混匀
3. 加入xx微升待测样品或HEPENGBIO标准液(Reagent C)
4. 上下倾倒数次,混匀,并同时计时30秒
5. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品初始读数(30秒读数)
6. 放进37℃恒温水槽孵育1分钟
7. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品终点读数 (90秒读数)
8. 样品实际读数=样品终点读数-样品初始读数
 
三、计算样品浓度
 
 
注意事项
 
1. 本产品为50次操作,包括标准样品
2. 本产品检测范围在0.09毫克/分升(8微摩尔/升)至15毫克/分升(13微摩尔/升)
3. 建议使用新鲜肝素抗凝血液,在4℃冰箱可以保持24小时;暂时不予检测,放进-80℃保存
4. 尿液样品在4℃冰箱可以保持7天;暂时不予检测,需放进-80℃保存,1月内完成检测
5. 操作时,须戴手套
6. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
7. 系统操作过程中,标准样品测定只需1次
8. 试剂出现沉淀可以离心去除后检测
9. 空白读数大于1.8,则不宜使用
10. 测定值由低到高变化
11. 用户可以使用490nm至510nm波长范围的任一波长进行检测
12. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
13. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度;例如尿液样品需稀释50倍
14. 样品中胆红素大于55毫克/分升、血红蛋白大于1克/升可能干扰检测
15. 肌酐浓度换算:1毫克/分升=88.4微摩尔/升
16. 正常值参考如下
 
17. 建议用户建立自己的正常值范围
             
                产品内容
HEPENGBIO反应液(Reagent A) 毫升
HEPENGBIO碱性液(Reagent B) 毫升
HEPENGBIO标准液(Reagent C) 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反应液(Reagent A)避免光照;试剂具有腐蚀性,注意操作安全;有效保证6月
用户自备
恒温培养箱:用于反应孵育
比色皿:用于比色的容器
分光光度仪:用于比色分析
实验步骤
一、测定准备
1. 准备好待测样品,置于冰槽里
2. 设定好分光光度仪(温度为37℃):波长492nm,并置零
二、 样品测定
1. 移取xx微升HEPENGBIO反应液(Reagent A)到新的比色皿
2. 加入xx微升HEPENGBIO碱性液(Reagent B),混匀
3. 加入xx微升待测样品或HEPENGBIO标准液(Reagent C)
4. 上下倾倒数次,混匀,并同时计时30秒
5. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品初始读数(30秒读数)
6. 放进37℃恒温水槽孵育1分钟
7. 即刻放进分光光度仪检测,此为样品终点读数 (90秒读数)
8. 样品实际读数=样品终点读数-样品初始读数
三、计算样品浓度
注意事项
1. 本产品为50次操作,包括标准样品
2. 本产品检测范围在0.09毫克/分升(8微摩尔/升)至15毫克/分升(13微摩尔/升)
3. 建议使用新鲜肝素抗凝血液,在4℃冰箱可以保持24小时;暂时不予检测,放进-80℃保存
4. 尿液样品在4℃冰箱可以保持7天;暂时不予检测,需放进-80℃保存,1月内完成检测
5. 操作时,须戴手套
6. 试剂具有腐蚀性,注意操作安全
7. 系统操作过程中,标准样品测定只需1次
8. 试剂出现沉淀可以离心去除后检测
9. 空白读数大于1.8,则不宜使用
10. 测定值由低到高变化
11. 用户可以使用490nm至510nm波长范围的任一波长进行检测
12. 比色测定后,比色皿须清洗彻底
13. 如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度;例如尿液样品需稀释50倍
14. 样品中胆红素大于55毫克/分升、血红蛋白大于1克/升可能干扰检测
15. 肌酐浓度换算:1毫克/分升=88.4微摩尔/升
16. 正常值参考如下
17. 建议用户建立自己的正常值范围


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