胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。菲律宾（FILIPIN）是一类由四种同分异构体的多烯抗生素（polyene antibiotics）或多马霉素（polyene macrolide）的总称。源自于S. FILIPINENSIS细菌的培养液中。其分子式为C35H58O11，分子量为654.8。菲律宾与胆固醇结合形成聚集体或复合物。由于石蜡包埋的组织切片在去石蜡的过程中，有机溶剂诸如二甲苯等容易破坏和减少组织中的脂质成分，因此使用非二甲苯类脱蜡，以最大程度保护组织中的胆固醇成分是菲律宾染色的关键。
 
产品内容
 
HEPNGBIO脱蜡液（Reagent A）          50毫升
HEPNGBIO净化液（Reagent B）   10毫升
HEPNGBIO清理液（Reagent C）   50毫升
HEPNGBIO抗干扰液（Reagent D）        10毫升
HEPNGBIO染色液（Reagent E）    5毫升
产品说明书    1份
 
保存方式
 
保存HEPNGBIO染色液（Reagent E）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月
 
用户自备
 
荧光显微镜：用于样品染色后观察分析
 
 
实验步骤
 
一、 脱蜡处理
 
1． 取出待测的6微米厚的石蜡包埋的组织切片
2． 小心加上500微升HEPNGBIO脱蜡液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：使用前，摇匀脱蜡液）
3． 放进70℃恒温培养箱里孵育5分钟
4． 即刻小心移去切片上的HEPNGBIO脱蜡液（Reagent A）
5． （选择步骤）重复实验步骤2至4一次
6． 小心加上200微升HEPNGBIO净化液（Reagent B）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育2分钟
8． 小心移去切片上的HEPNGBIO净化液（Reagent B）
9． 进一步依次常规净化处理：用户自备的100%乙醇、70%乙醇、50%乙醇
10． 小心加上200微升HEPNGBIO清理液（Reagent C）在切片上，铺满整个切片样品表面
11． 室温下孵育3分钟
12． 小心移去切片上的HEPNGBIO清理液（Reagent C）
三、样本染色处理
1． 小心加上200微升HEPNGBIO抗干扰液（Reagent D），铺满整个切片样品表面
2． 室温下孵育10分钟
3． 小心移去切片上的HEPNGBIO抗干扰液（Reagent D）
4． 小心加上100微升HEPNGBIO染色液（Reagent E），铺满整个切片样品表面
5． 室温下孵育30分钟，避免光照
6． 小心移去切片上的HEPNGBIO染色液（Reagent E）
7． 小心加上200微升HEPNGBIO清理液（Reagent C），清洗样品表面
8． 小心移去切片上的HEPNGBIO清理液（Reagent C）
9． 重复实验步骤7至8二次
10． 即刻放上盖玻片或封片
11． 在荧光显微镜下观察：激发波长：340nm；散发波长：430nm――胆固醇阳性呈现蓝色荧光