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赫澎(上海)生物科技有限公司
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特殊石蜡切片中性脂质油红O直接染色试剂盒
产品编号 HPBIO-JM4761
中文名称: 特殊石蜡切片中性脂质油红O直接染色试剂盒
英文名称:
脂类物质(LIPIDS)是一类脂溶性(疏水性)的自然分子,包括脂肪酸(FATTY ACID)及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂,以及其它固醇类(STEROL)物质,例如胆固醇。脂类物质在机体中具有能量储存的作用,是膜结构的组成成分和细胞信号分子。油性红O(Oil Red O),又称为27号红色溶剂(Solvent Red 27)或苏丹红5B(Sudan Red 5B),是一种脂溶性偶氮染料(LYSOCHROME AZO DYE)。其分子式为C26H24N4O,分子量为408.51。染色显示脂类物质呈红色。由于石蜡包埋的组织切片在去石蜡的过程中,有机溶剂诸如二甲苯等容易破坏和减少组织中的脂质成分,因此使用非二甲苯类脱蜡,以最大程度保护组织中的脂质成分是油性红O染色的关键。
 
产品内容
 
HEPENGBIO脱蜡液(Reagent A)          50毫升
HEPENGBIO净化液(Reagent B)   10毫升
HEPENGBIO清理液(Reagent C)   50毫升
HEPENGBIO脱水液(Reagent D)   20毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent E)   10毫升
HEPENGBIO澄清液(Reagent F)   10毫升
产品说明书    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里,避免光照;有效保证3月
 
用户自备
 
苏木素复染试剂盒(HEPENGBIO80067):用于常规染色后复染
经典水相封片液(HEPENGBIO12146):用于染色后封片处理
烘箱:用于石蜡切片处理
中性树脂:用于切片封片
光学显微镜:用于切片染色后观察分析
 
实验步骤
 
一、 脱蜡处理
 
1. 取出待测的6微米厚的石蜡包埋的组织切片
2. 小心加上500微升HEPENGBIO脱蜡液(Reagent A在切片上,铺满整个切片样品表面(注意:使用前,摇匀脱蜡液)
3. 放进70℃恒温培养箱里孵育5分钟
4. 即刻小心移去切片上的HEPENGBIO脱蜡液(Reagent A
5. (选择步骤)重复实验步骤2至4一次
6. 小心加上200微升HEPENGBIO净化液(Reagent B在切片上,铺满整个切片样品表面
7. 室温下孵育2分钟
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO净化液(Reagent B
9. 进一步依次常规净化处理:用户自备的100%乙醇、70%乙醇、50%乙醇
10. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C在切片上,铺满整个切片样品表面
11. 室温下孵育3分钟
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent C
 
二、 样本染色处理
 
1. 小心加上200微升HEPENGBIO脱水液(Reagent D,覆盖整个生长表面
2. 室温下静置5分钟
3. 小心抽去HEPENGBIO脱水液(Reagent D
4. 重复实验步骤1至3一次
5. 小心加上200微升HEPENGBIO染色液(Reagent E,覆盖整个生长表面
6. 室温下静置7分钟;或直至可见红色
7. 小心抽去HEPENGBIO染色液(Reagent E
8. 室温下,小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C
9. 室温下孵育2分钟
10. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C
 
三、样本复染处理
 
1. 小心加上200微升HEPENGBIO澄清液(Reagent F),覆盖整个生长表面
2. 室温下孵育5分钟
3. 小心抽去HEPENGBIO澄清液(Reagent F
4. 小心加入200微升HEPENGBIO清理液(Reagent C
5. 室温下孵育2分钟
6. 小心抽去HEPENGBIO清理液(Reagent C
7. 样本复染处理(苏木素)
8. 即刻在一般光学显微镜下观察:脂类物质呈现红色(如果复染则细胞核呈现蓝色)
 
 
 
注意事项
 
1. 本产品为50次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 建议用户避免使用常规石蜡包埋组织切片,即石蜡包埋前避免二甲苯等透明处理
4. 染色时更换试剂溶液时,保持切片面基本晾干
5. 试剂溶液在切片表面时,避免有气泡存在,同时确保铺满切片表面
6. 整个操作,在避光状态下进行
7. 样品染色避免过度,肉眼可见红色即可终止染色
8. 建议使用HEPENGBIO苏木素复染试剂盒(HEPENGBIO80067),增加染色对比度
9. 染色完成后,即刻进行光学显微镜观察 
10. 样品染色后保存,避免光照
11. 封片处理,避免使用有机溶剂类包括乙醇等,而使用水相封片液;建议使用HEPENGBIO经典水相封片液
 
检测报告(COA)
使用说明
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