间质干细胞（mesenchymal stem cell）分化产生脂肪细胞（adipocyte）、成骨细胞（osteoblast）、肌细胞（myocyte和软骨细胞（chondrocyte）。软骨细胞及其细胞外基质（extracellular matrix）构成软骨组织（cartilage tissue），其含有硫酸软骨素（chondroitin sulfate）和硫酸角质素（karatan sulfate）等为主要成分的蛋白多糖（proteoglycan）聚糖（aggrecan），成为软骨生成（chondrogenesis）的标记（indicator）。甲苯胺蓝（toluidine blue）是一种异染性（metachromatic）阳离子碱性染料，使软骨组织细胞中的酸性蛋白聚糖（proteoglycan）染色，呈现紫蓝色。
 
产品内容
 
HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）         300毫升（自备）
HEPENGBIO补水液A（Reagent B）  XX毫升
HEPENGBIO补水液B（Reagent C）  XX毫升
HEPENGBIO补水液C（Reagent D）  XX毫升
HEPENGBIO补水液D（Reagent E）  XX毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent F）  XX毫升
HEPENGBIO酸性液（Reagent G）  XX毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent H）  XX毫升
产品说明书    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO染色液（Reagent H），避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全。有效保证3月
 
用户自备
 
小型染色缸：用于石蜡切片的脱蜡操作
光学显微镜：用于组织细胞染色后观察分析
 
实验步骤
 
一、 脱蜡处理
 
1． 取出10片待测的石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）
2． （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟
3． （选择步骤）室温下静置15分钟
4． 按下表依次放进小染色缸里孵育
 

染色缸	孵育时间
XX毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）	XX分钟
XX毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）	XX分钟
XX毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）	XX分钟
XX毫升HEPENGBIO补水液A（Reagent B）	XX分钟
XX毫升HEPENGBIO补水液B（Reagent C）	XX分钟
XX毫升HEPENGBIO补水液C（Reagent D）	XX分钟
XX毫升HEPENGBIO补水液D（Reagent E）	XX分钟

 
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液D（Reagent E）
6． 小心加上XX微升HEPENGBIO清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5分钟
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
二、样本染色处理
1． 小心加上XX微升HEPENGBIO酸性液（Reagent G），铺满整个切片样品表面
2． 室温下孵育15秒
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO酸性液（Reagent G）
4． 小心加上XX微升HEPENGBIO染色液（Reagent H），铺满整个切片样品表面
5． 室温下，孵育5分钟，避免光照
6． 小心移去切片上的HEPENGBIO染色液（Reagent H）
7． 室温下，小心将切片置入XX毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
 
 
 
三、 （选择步骤）样本复染处理
 
1． 样本复染处理（固绿）
2． 放上盖玻片或封片（注意：避免使用水相封片液）
3． 即刻在一般光学显微镜下观察：阳性组织细胞呈现紫蓝色，细胞核呈现深蓝色（如果复染：背景呈现浅绿色调）
 
注意事项
 
1． 本产品为50次操作
2． 操作时，须带手套
3． 试剂具有腐蚀性，注意操作安全
4． 石蜡包埋前，组织样品须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，否则造成样品支离破碎
5． 所有操作在室温下进行
6． 用户可以使用二甲苯替代HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）
7． 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
8． 建议使用HEPENGBIO固绿复染试剂盒（ ），增强染色对比度
9． 组织细胞染色完成后，即刻进行光学显微镜观察