本公司所有产品仅供实验室科学研究使用，不得用于医疗诊断，食品，化妆品和其他用途。
产品信息价格说明书等相关资料，可以联系客服咨询索取。
期待新老客户咨询订购.....
胶原蛋白（collagen）是最为丰富的蛋白质家族，构成结缔组织的主要元素，包括皮肤、骨组织、筋腱（tendon）、韧带（ligament）、心脏等，在炎症过程中发生重要作用。哺乳动物组织中有超过26个类型胶原蛋白，由3个α链（甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸）组成，构建稳定且牢固的三重螺旋结构（triple helical structure），抵抗各种压力，包括蛋白酶降解、热力、以及各种化学性和物理性影响。其中I型胶原蛋白为纤维状（fibrillar）胶原蛋白，由2个相同的α1链和1个α2链组成；而II型胶原蛋白限于无血管组织，例如软骨组织、眼睛的玻璃体组织、关节透明软骨（articular hyaline cartilage）等，会诱发关节炎、眼病和多软骨炎（polychondritis）等疾病。多聚II型胶原蛋白构建成人关节软骨组织的核心纤维网状结构，占三分之二干重和细胞外框架。 通过抗I型胶原蛋白多克隆抗体以及辣根过氧化物酶缀合物二抗（Peroxidase conjugated antibody）反应，进而使用染料二氨基联苯胺染色显示II型胶原蛋白软骨细胞为棕褐色。 
 
产品内容
 
HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）         300毫升（自备）
HEPENGBIO补水液A（Reagent B）  毫升
HEPENGBIO补水液B（Reagent C）  毫升
HEPENGBIO补水液C（Reagent D）  毫升
HEPENGBIO补水液D（Reagent E）  毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent F）  毫升
HEPENGBIO修复液（Reagent G）  毫升
HEPENGBIO封阻液（Reagent H）  毫升
HEPENGBIO一抗液（Reagent I）  毫升
HEPENGBIO二抗液（Reagent J）  毫升
HEPENGBIO显色液A（Reagent K） 微升
HEPENGBIO显色液B（Reagent L）  毫升
产品说明书   1份
 
保存方式
 
保存HEPENGBIO修复液（Reagent G）、HEPENGBIO一抗液（Reagent I）、HEPENGBIO二抗液（Reagent J）和HEPENGBIO显色液A（Reagent K）在－20℃冰箱里，严格避免反复冻融，其余的保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO二抗液（Reagent J）和HEPENGBIO显色液A（Reagent K），避免光照；有效保证3月
 
用户自备
 
小型染色缸：用于石蜡切片的脱蜡和染色操作
盖玻片：用于抗体孵育操作
光学显微镜：用于细胞染色后观察分析
 
特别注意
 
1． HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）必须在实验操作前即刻混匀；混匀后切忌久放不用或储存后备用；用完扔掉
2． HEPENGBIO显色液A（Reagent K）如果出现沉淀，须过滤后再用
 
实验步骤
 
一、 脱蜡处理
 
1． 取出10片4至10微米厚的待测石蜡包埋的组织切片（注意：石蜡包埋前，组织切片须用10％甲醛4℃条件下，固定16小时，此步很重要）
2． （选择步骤）放进80℃烘箱，孵育30分钟
3． （选择步骤）室温下静置15分钟
4． 按下表依次放进小染色缸里孵育

染色缸	孵育时间
xx毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO脱蜡液（Reagent A）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液A（Reagent B）	3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液B（Reagent C）	3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液C（Reagent D）	3分钟
xx毫升HEPENGBIO补水液D（Reagent E）	3分钟

 
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO补水液D（Reagent E）
6． 小心加上xx微升HEPENGBIO清理液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5分钟
小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
二、样本修复处理
1． 小心加上xx微升HEPENGBIO修复液（Reagent G），铺满整个切片样品表面
2． 室温下孵育5分钟
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO修复液（Reagent G）
4． 室温下，将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育5分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
6． 小心加上xx微升HEPENGBIO封阻液（Reagent H），铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育30分钟
8． 小心移去切片上的HEPENGBIO封阻液（Reagent H）
9． 室温下，将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育5分钟
10． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
 
三、 免疫标记处理
 
1． 小心加上xx微升含有HEPENGBIO一抗液（Reagent I），铺满整个切片样品表面
2． 室温下，孵育1小时，保持湿润，避免干燥（注意：可以使用盖玻片盖上孵育）
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO一抗液（Reagent I）
4． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
 
四、样本染色处理
 
在染色前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的HEPENGBIO显色液A（Reagent K）置入冰槽里融化，然后移取xx微升HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和xx毫升HEPENGBIO显色液B（Reagent L）到2毫升离心管，充分混匀，标记为HEPENGBIO显色工作液，置于暗室。然后进行下列操作：
 
1． 小心加上xx微升HEPENGBIO二抗液（Reagent J）在切片上，铺满整个切片样品表面（注意：可以使用盖玻片盖上孵育）
2． 室温下孵育30分钟，避免光照
3． 小心移去切片上的HEPENGBIO二抗液（Reagent J）
4． 室温下，小心将切片置入5xx0毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中孵育2分钟
5． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
6． 小心加上xx微升含有HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）的HEPENGBIO显色工作液，铺满整个切片样品表面
7． 室温下孵育5至30分钟，或直至样本出现棕褐色
8． 小心移去切片上含有HEPENGBIO显色液A（Reagent K）和HEPENGBIO显色液B（Reagent L）的HEPENGBIO显色工作液
9． 室温下，小心将切片置入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）中浸泡5秒
10． 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液（Reagent F）
11． （选择步骤）进行甲基绿或苏木素复染（注意：建议使用HEPENGBIO甲基绿复染试剂盒）
12． 放上盖玻片或封片
13． 即刻在一般光学显微镜下观察：阳性细胞呈现棕褐色