在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了最有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denatured protein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（native protein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redox potential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtration chromatography）等，以达到蛋白复性的效果。L-精氨酸（L－arginine）、聚乙二醇（PEG）、硫代甜菜碱（sulfobetaine）、去垢剂、变性剂等将影响化学稀释复性处理的效率。
 
产品内容
 
HEPENGBIO稀释液（Reagent A）   毫升
HEPENGBIO还原液（Reagent B）      毫升
HEPENGBIO平衡液（Reagent C）      毫升
产品说明书       1份
 
保存方式
 
保存在-20℃冰箱里， 避免光照，有效保证6月
 
用户自备
 
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
恒温摇床：用于反应孵育
 
实验步骤
 
方法一：还原复性
 
1． 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2． 移取适量的蛋白样品到1.5毫升离心管
3． 加入适量的HEPENGBIO稀释液（Reagent A）调整蛋白浓度到10毫克/毫升
4． 移取100微升蛋白样品到新的1.5毫升离心管
5． 加入xx微升HEPENGBIO还原液（Reagent B）
6． 放进20℃恒温摇床孵育4小时，速度为200RPM
7． （选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
8． 即刻放进－70℃冰箱里保存
 
方法二：平衡复性
 
1．准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2．移取适量的蛋白样品到1.5毫升离心管
3． 加入适量的HEPENGBIO稀释液（Reagent A）调整蛋白浓度到5毫克/毫升
4． 移取5微升蛋白样品到新的1.5毫升离心管
5． 加入xx微升HEPENGBIO平衡液（Reagent C）
6． 放进28℃恒温摇床孵育2小时，速度为200RPM
7． （选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
8． 即刻放进－70℃冰箱里保存