在蛋白纯化和融化过程中,特别是包涵体蛋白,变性剂(denaturant)提供了最有效的手段,其获得的纯化蛋白属于变性蛋白(denatured protein)。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白(native protein),即具有蛋白质的自然结构和活性,需要进行蛋白复性(renaturation)或重新折叠(refolding)。蛋白复性是一个复杂的过程,诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位(redox potential)和温度等物化因子,影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理,而后者采用物理方法(例如透析、膜过滤(diafiltration)、凝胶过滤层析(gel-filtration chromatography)等,以达到蛋白复性的效果。L-精氨酸(L-arginine)、聚乙二醇(PEG)、硫代甜菜碱(sulfobetaine)、去垢剂、变性剂等将影响化学稀释复性处理的效率。
 
产品内容
 
HEPENGBIO稳定液(Reagent A) 毫升
产品说明书 1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里,有效保证6月
 
用户自备
 
1.5毫升离心管:用于样品保存的容器
恒温摇床:用于反应孵育
 
实验步骤
 
1. 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2. 移取50微升蛋白样品(10毫克/毫升)到1.5毫升离心管
3. 加入xx微升HEPENGBIO稳定液(Reagent A)
4. 放进20℃恒温摇床孵育2小时,速度为200RPM
5. (选择步骤)移取10微升进行生物检测,例如蛋白功能或活性:比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
6. 即刻放进-70℃冰箱里保存
             
                产品内容
HEPENGBIO稳定液(Reagent A) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里,有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于样品保存的容器
恒温摇床:用于反应孵育
实验步骤
1. 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2. 移取50微升蛋白样品(10毫克/毫升)到1.5毫升离心管
3. 加入xx微升HEPENGBIO稳定液(Reagent A)
4. 放进20℃恒温摇床孵育2小时,速度为200RPM
5. (选择步骤)移取10微升进行生物检测,例如蛋白功能或活性:比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
6. 即刻放进-70℃冰箱里保存


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