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产品信息价格说明书等相关资料,可以联系客服咨询索取。
HEPENGBIO纯化线粒体氧化应激活性氧超氧阴离子MitoSOX红色荧光测定试剂盒
产品说明书
主要用途
HEPENGBIO纯化线粒体氧化应激活性氧超氧阴离子MitoSOX红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂MitoSOX,在线粒体氧化损伤条件下,产生红色荧光,来定量检测线粒体内超氧阴离子活性氧族的生成和增加的方法。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。其中线粒体氧化磷酸化副产物之一是超氧阴离子,为线粒体内最主要的活性氧族,与心血管疾病,包括高血压、冠状动脉硬化、糖尿病相关的血管疾病、神经退行性疾病(巴金森氏症、阿茨罕默症、肌萎缩硬化症)相关。MitoSOX是一种选择性在线粒体内长期滞留而不外漏的染色剂。一旦被超氧自由基阴离子氧化,便产生荧光。据此证明线粒体内超氧阴离子活性氧族的存在。
产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 3毫升
HEPENGBIO补充液(Reagent B) 3毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent C) 40微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,HEPENGBIO染色液(Reagent C),严格避免光照;有效保证6月
用户自备
黑色96孔板:用于样品操作的容器
培养箱:用于染色孵育
(共聚焦)荧光显微镜:用于观察荧光线粒体
荧光酶标仪:用于测定线粒体荧光强度
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂放进冰槽里融化,避免光照;同时从-80℃冰箱里取出待测的线粒体,放进冰槽里融化。然后进行下列操作。
1. 准备1个黑色96孔板,标记好背景对照孔和待测样品孔
2. 分别加入150微升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A)
3. 移取50微升线粒体悬液(总量为50微克线粒体蛋白)到黑色96孔板的相应待测样品孔里
4. 加入50微升HEPENGBIO补充液(Reagent B)到黑色96孔板的相应背景对照孔里
5. 分别加入2微升HEPENGBIO染色液(Reagent C)到上述孔里
6. 放进37℃培养箱里孵育15分钟,避免光照
7. 选择下列方式之一进行操作:
a) 使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):
1)移取10微升上述悬液到载波片上,盖上盖玻片
2)激发波长510nm,散发波长580nm――
红色荧光增强,表明超氧阴离子含量高
b) 或使用荧光酶标仪检测(定量检测):
1)直接放进荧光酶标仪:激发波长510nm,散发波长580nm――
样品RFU-对照RFU=实际线粒体RFU:增高,表明超氧阴离子含量高
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 孵育时,须避免光照
4. 建议染色完成后,即刻进行荧光分析
本公司提供系列活性氧检测试剂产品
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HEPENGBIO纯化线粒体氧化应激活性氧超氧阴离子MitoSOX红色荧光测定试剂盒
产品说明书
主要用途
HEPENGBIO纯化线粒体氧化应激活性氧超氧阴离子MitoSOX红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂MitoSOX,在线粒体氧化损伤条件下,产生红色荧光,来定量检测线粒体内超氧阴离子活性氧族的生成和增加的方法。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡。其中线粒体氧化磷酸化副产物之一是超氧阴离子,为线粒体内最主要的活性氧族,与心血管疾病,包括高血压、冠状动脉硬化、糖尿病相关的血管疾病、神经退行性疾病(巴金森氏症、阿茨罕默症、肌萎缩硬化症)相关。MitoSOX是一种选择性在线粒体内长期滞留而不外漏的染色剂。一旦被超氧自由基阴离子氧化,便产生荧光。据此证明线粒体内超氧阴离子活性氧族的存在。
产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 3毫升
HEPENGBIO补充液(Reagent B) 3毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent C) 40微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,HEPENGBIO染色液(Reagent C),严格避免光照;有效保证6月
用户自备
黑色96孔板:用于样品操作的容器
培养箱:用于染色孵育
(共聚焦)荧光显微镜:用于观察荧光线粒体
荧光酶标仪:用于测定线粒体荧光强度
实验步骤
实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂放进冰槽里融化,避免光照;同时从-80℃冰箱里取出待测的线粒体,放进冰槽里融化。然后进行下列操作。
1. 准备1个黑色96孔板,标记好背景对照孔和待测样品孔
2. 分别加入150微升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A)
3. 移取50微升线粒体悬液(总量为50微克线粒体蛋白)到黑色96孔板的相应待测样品孔里
4. 加入50微升HEPENGBIO补充液(Reagent B)到黑色96孔板的相应背景对照孔里
5. 分别加入2微升HEPENGBIO染色液(Reagent C)到上述孔里
6. 放进37℃培养箱里孵育15分钟,避免光照
7. 选择下列方式之一进行操作:
a) 使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):
1)移取10微升上述悬液到载波片上,盖上盖玻片
2)激发波长510nm,散发波长580nm――
红色荧光增强,表明超氧阴离子含量高
b) 或使用荧光酶标仪检测(定量检测):
1)直接放进荧光酶标仪:激发波长510nm,散发波长580nm――
样品RFU-对照RFU=实际线粒体RFU:增高,表明超氧阴离子含量高
注意事项
1. 本产品为20次操作
2. 操作时,须戴手套
3. 孵育时,须避免光照
4. 建议染色完成后,即刻进行荧光分析
本公司提供系列活性氧检测试剂产品