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HEPENGBIO纯化线粒体ATP含量光度法定量检测试剂盒产品说明书
主要用途
HEPENGBIO纯化线粒体ATP含量光度法定量检测试剂是一种旨在通过3-磷酸甘油磷酸激酶和3-磷酸甘油醛脱氢酶酶偶联反应系统中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法来测定样品中ATP含量的方法。其适用于各种细胞或组织纯化的线粒体裂解悬液样品(动物、人体、昆虫等)中ATP的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate;ATP)存在于所有代谢活跃的细胞内,是细胞活力的标志。一旦细胞凋亡或坏死,ATP浓度急遽下降。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)是糖酵解通路中被转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD)而产生乙醇所必须的辅助因子,是细胞生理学中能量代谢、脂肪酸代谢和糖代谢的重要因子。基于底物ATP在磷酸甘油激酶(phosphoglycerate kinase)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)酶偶联反应系统中,产生3-磷酸甘油醛(Glyceraldehyde-3-Phosphate;G-3-P),同时其辅酶因子还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;β-NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide;β-NAD),通过测定吸光值的变化(340nm 波长),来定量分析ATP的浓度。其反应方式为:
Phosphoglycerate kinase
3-phosphoglycerate + ATP → 1,3-diphosphoglycerate + ADP
Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
1,3-diphosphoglycerate + NADH + H+ → glyceraldehyde-3-phosphate + NAD++ Pi
glyceraldehyde-3-phosphate + hydrazine → glyceraldehyde-3-phosphate hydrazone
产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 10毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent B) 1.25毫升
HEPENGBIO底物液(Reagent C) 1.25毫升
HEPENGBIO酶促液(Reagent D) 1.25毫升
HEPENGBIO阴性液(Reagent E) 1毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent F) 1毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO缓冲液(Reagent A)、HEPENGBIO反应液(Reagent B)、HEPENGBIO底物液(Reagent C)和HEPENGBIO酶促液(Reagent D)在-20℃冰箱里;其余的保存在4℃冰箱里;HEPENGBIO反应液(Reagent B)避免光照;有效保证6月
用户自备
比色皿或96孔板:用于光度分析的容器
分光光度仪或酶标仪:用于光度分析
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主要用途
HEPENGBIO纯化线粒体ATP含量光度法定量检测试剂是一种旨在通过3-磷酸甘油磷酸激酶和3-磷酸甘油醛脱氢酶酶偶联反应系统中,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷(NADH)氧化后峰值的降低,即采用光度法来测定样品中ATP含量的方法。其适用于各种细胞或组织纯化的线粒体裂解悬液样品(动物、人体、昆虫等)中ATP的浓度检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate;ATP)存在于所有代谢活跃的细胞内,是细胞活力的标志。一旦细胞凋亡或坏死,ATP浓度急遽下降。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)是糖酵解通路中被转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD)而产生乙醇所必须的辅助因子,是细胞生理学中能量代谢、脂肪酸代谢和糖代谢的重要因子。基于底物ATP在磷酸甘油激酶(phosphoglycerate kinase)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)酶偶联反应系统中,产生3-磷酸甘油醛(Glyceraldehyde-3-Phosphate;G-3-P),同时其辅酶因子还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;β-NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide;β-NAD),通过测定吸光值的变化(340nm 波长),来定量分析ATP的浓度。其反应方式为:
Phosphoglycerate kinase
3-phosphoglycerate + ATP → 1,3-diphosphoglycerate + ADP
Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase
1,3-diphosphoglycerate + NADH + H+ → glyceraldehyde-3-phosphate + NAD++ Pi
glyceraldehyde-3-phosphate + hydrazine → glyceraldehyde-3-phosphate hydrazone
产品内容
HEPENGBIO缓冲液(Reagent A) 10毫升
HEPENGBIO反应液(Reagent B) 1.25毫升
HEPENGBIO底物液(Reagent C) 1.25毫升
HEPENGBIO酶促液(Reagent D) 1.25毫升
HEPENGBIO阴性液(Reagent E) 1毫升
HEPENGBIO裂解液(Reagent F) 1毫升
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用户自备
比色皿或96孔板:用于光度分析的容器
分光光度仪或酶标仪:用于光度分析