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| HPBIO-JM2563 | 酚氯仿法DNA萃取试剂盒 | 50次 |
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HEPENGBIO酚氯仿法（PC8）DNA萃取试剂盒产品说明书
主要用途
HEPENGBIO酚氯仿法（PC8）DNA萃取试剂是一种旨在使蛋白质变性（denaturation），同时彻底清除蛋白质（deproteination）及其它成分来达到纯化DNA的方法。其适用于单纯DNA和RNA操作或PCR产物的萃取以及SAGE技术等。产品即到即用，性能稳定，严格无核酶污染，萃取纯度高。
技术背景
酚或酚氯仿混合物是提纯核酸成分的重要步骤。通过这些化学处理，使混杂在核酸里的蛋白质二维结构受到破坏，然后经过相位分离将非核酸成分除去，为下一步乙醇浓缩沉淀打好基础。HEPENGBIO酚氯仿试剂较之传统的配方更优化。
产品内容
HEPENGBIO缓冲液（Reagent A） 20毫升
HEPENGBIO萃取液（Reagent B） 30毫升
HEPENGBIO浓缩液（Reagent C） 5毫升
HEPENGBIO沉淀液（Reagent D） 50毫升
HEPENGBIO助沉液（Reagent E） 50微升
HEPENGBIO清理液（Reagent F） 50毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免光照，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品操作的容器
涡旋震荡仪：用于样品混匀
微型台式离心机：用于样品分离
实验步骤
1． 准备1个新的1.5毫升离心管
2． 加入300微升样品或加入适量的HEPENGBIO缓冲液（Reagent A）达到样品总容量为300微升
3． 加入300微升HEPENGBIO萃取液（Reagent B）到1.5毫升离心管
4． 按上盖子后，在涡旋震荡仪上强烈震荡30秒
5． 放进微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
6． 移出上层液相溶液到新的1.5毫升离心管，留下25微升相位交界面的溶液
7． （选择步骤）如果样品本身污染严重（例如含有过多组织蛋白等），重复实验步骤3至6
8． 加入100微升HEPENGBIO浓缩液（Reagent C）到离心管
9． 加入1毫升HEPENGBIO沉淀液（Reagent D）
10． 加入1微升HEPENGBIO助沉液（Reagent E）
11． 在涡旋震荡仪上震荡15秒，充分混匀
12． （选择步骤）如果DNA样品为纳克级或片断为20个碱基，选择置于－70℃冰箱孵育2小时或－20℃冰箱孵育过夜
13． 放进微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
14． 小心抽去上清液
15． 加入1毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）
16． 放进微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
17． 小心抽去上清液
18． 空气中晾干
19． 加入100微升HEPENGBIO缓冲液（Reagent A）
20． 放进－20℃冰箱长期保存
21． 进行后续乙醇沉淀
注意事项
1． 本产品为50次操作
2． 操作时须戴手套
3． HEPENGBIO萃取液（Reagent B）具有腐蚀性，使用时小心谨慎
4． 如果样品量增加，则相应增加试剂用量：样品容量和试剂用量等量使用；最低不得低于200微升
5． HEPENGBIO萃取液（Reagent B）和样品要充分混匀
6． 移出操作时，避免接触相位界面，以防污染
本公司提供系列核酸纯化试剂产品
