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期待新老客户咨询订购.....HPBIO-JM6211 组织Akt/PKB激酶总活性定量检测试剂盒（A/B/C） 20次
HEPENGBIO组织Akt/PKB激酶活性光度法定量检测试剂盒
产品说明书
主要用途
HEPENGBIO组织Akt/PKB激酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过多肽底物，在敏感性抑制剂存在与否的情况下，受到Akt1/PKBα磷酸化后，进而由丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统，测定产生ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反应， 即采用光度法测定其氧化后峰值的变化，以分析组织裂解样品中Akt/PKB活性的方法。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中Akt/PKB激酶的定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。
技术背景
蛋白激酶B（protein kinase B；PKB），又称为v-akt鼠源胸腺瘤病毒肿瘤基因同源体（v-akt murine thymoma viral oncogene homolog；Akt），是高度同源的PKB/AKT家属（PKBα/Akt1、PKBβ/Akt2、PKBγ/Akt3）中的一员，属于丝氨酸/苏氨酸激酶（serine/threonine protein kinase；EC2.7.11.1）家族的成员，是哺乳动物细胞信号的重要分子之一。Akt/PKB分为3个高度同源的亚型：PKBα/Akt1、PKBβ/Akt2、PKBγ/Akt3。PKBα/Akt1与细胞存活通路、蛋白合成通路有关，通过抑制细胞凋亡，帮助细胞存活，由此导致组织生长，尤其是骨骼肌肥大，甚至癌症发生；PKBβ/Akt2与胰岛素代谢通路有关，诱导葡萄糖转运；PKBγ/Akt3主要在脑组织中表达，与脑组织生长有关。作为一种生长因子调节蛋白激酶，其含有普列克底物蛋白（pleckstrin）同源的结构域，与磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide 3-OH kinase；PI3K）产物结合，使PKBα/Akt1转位到细胞膜上，受到肌醇磷脂依赖性激酶1（phosphoinoside-dependent kinase 1；PDK1）的磷酸化而激活，达到调控细胞繁殖、细胞周期、糖原合成、血管生成等作用。PKB/Akt成为癌症治疗的药物靶标。其磷酸化目标序列为RPRAATF。基于底物RPRAATF，在ATP的参与下，受到Akt/PKB激酶的磷酸化，获得产物磷酸化多肽，进而通过丙酮酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）反应系统中，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其吸光峰值的变化（340nm），来定量分析Akt/PKB激酶的总活性。其反应方式为：
Akt/PKB
RPRAATF + ATP → RPRAApTF + ADP
pyruvate kinase
Phosphoenolpyruvate + ADP → pyruvate + ATP
lactate dehydrogenase
pyruvate + NADH → lactate + NAD+
（高吸收峰） （低吸收峰）
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 60毫升
HEPENGBIO裂解液（Reagent B） 10毫升
HEPENGBIO缓冲液（Reagent C） 4毫升
HEPENGBIO酶促液（Reagent D） 500微升
HEPENGBIO反应液（Reagent E） 500微升
HEPENGBIO底物液（Reagent F） 500微升
HEPENGBIO阴性液（Reagent G） 500微升
产品说明书 1份
保存方式
保存HEPENGBIO清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，严格避免光照和反复冻融；有效保证6月
用户自备
Akt/PKB激酶：用于抑制剂筛选
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器
（微型）台式离心机：用于细胞预处理
200微升1厘米光径比色皿或96孔板：用于光度分析操作的容器
分光光度仪或酶标仪：用于样品光度分析
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主要用途
HEPENGBIO组织Akt/PKB激酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过多肽底物，在敏感性抑制剂存在与否的情况下，受到Akt1/PKBα磷酸化后，进而由丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统，测定产生ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）的氧化反应， 即采用光度法测定其氧化后峰值的变化，以分析组织裂解样品中Akt/PKB活性的方法。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、部分或完全纯化酶样品中Akt/PKB激酶的定量检测，以及抑制剂和激活剂的筛选。
技术背景
蛋白激酶B（protein kinase B；PKB），又称为v-akt鼠源胸腺瘤病毒肿瘤基因同源体（v-akt murine thymoma viral oncogene homolog；Akt），是高度同源的PKB/AKT家属（PKBα/Akt1、PKBβ/Akt2、PKBγ/Akt3）中的一员，属于丝氨酸/苏氨酸激酶（serine/threonine protein kinase；EC2.7.11.1）家族的成员，是哺乳动物细胞信号的重要分子之一。Akt/PKB分为3个高度同源的亚型：PKBα/Akt1、PKBβ/Akt2、PKBγ/Akt3。PKBα/Akt1与细胞存活通路、蛋白合成通路有关，通过抑制细胞凋亡，帮助细胞存活，由此导致组织生长，尤其是骨骼肌肥大，甚至癌症发生；PKBβ/Akt2与胰岛素代谢通路有关，诱导葡萄糖转运；PKBγ/Akt3主要在脑组织中表达，与脑组织生长有关。作为一种生长因子调节蛋白激酶，其含有普列克底物蛋白（pleckstrin）同源的结构域，与磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide 3-OH kinase；PI3K）产物结合，使PKBα/Akt1转位到细胞膜上，受到肌醇磷脂依赖性激酶1（phosphoinoside-dependent kinase 1；PDK1）的磷酸化而激活，达到调控细胞繁殖、细胞周期、糖原合成、血管生成等作用。PKB/Akt成为癌症治疗的药物靶标。其磷酸化目标序列为RPRAATF。基于底物RPRAATF，在ATP的参与下，受到Akt/PKB激酶的磷酸化，获得产物磷酸化多肽，进而通过丙酮酸激酶（pyruvate kinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase；LDH）反应系统中，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD），其吸光峰值的变化（340nm），来定量分析Akt/PKB激酶的总活性。其反应方式为：
Akt/PKB
RPRAATF + ATP → RPRAApTF + ADP
pyruvate kinase
Phosphoenolpyruvate + ADP → pyruvate + ATP
lactate dehydrogenase
pyruvate + NADH → lactate + NAD+
（高吸收峰） （低吸收峰）
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 60毫升
HEPENGBIO裂解液（Reagent B） 10毫升
HEPENGBIO缓冲液（Reagent C） 4毫升
HEPENGBIO酶促液（Reagent D） 500微升
HEPENGBIO反应液（Reagent E） 500微升
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HEPENGBIO阴性液（Reagent G） 500微升
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保存HEPENGBIO清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，严格避免光照和反复冻融；有效保证6月
用户自备
Akt/PKB激酶：用于抑制剂筛选
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器
（微型）台式离心机：用于细胞预处理
200微升1厘米光径比色皿或96孔板：用于光度分析操作的容器
分光光度仪或酶标仪：用于样品光度分析
