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通用型细菌16S rDNA 荧光定量PCR扩增检测试剂是一种旨在运用SYBR绿色荧光染料作为标记信号,针对微生物样本DNA进行保守性序列PCR扩增,实时检测和定量分析扩增产物的技术方法。可以被用于各种样品,包括血液、体液、组织、土壤等的细菌拷贝数的定量检测。产品即到即用,性能稳定,无核酶污染,操作便捷,敏感高效,定量准确,重复性强。
技术背景
16SrRNA作为非培养依赖性标记的分子指模(fingerprinting)技术,有别于传统的选择性培养技术,用于研究微生物的分类学(phylogenetics)。核糖体RNA(ribosome RNA)存在于所有微生物体内,且结构与功能进化保留;容易分离和识别;其一级和二级结构具有高度进化保守区域(conserved region)和物种特异性可变区域(variable region);其基因序列变异非常缓慢,且不会发生平行基因转移(horizontal gene transfer)。其包括5S、16S、23S。5S信息量不够充分;23S不稳定;而微生物16SrRNA基因较为稳定,初级结构含有1500个碱基。通过引物设计,扩增产物。SYBR绿色荧光染料,作为DNA结合染料,可以和扩增子(amplican)上双链DNA的任一小沟(minor groove)结合,而发出荧光信号。根据每一循环的荧光强度来确定扩增产物的产量,并用循环阈值(threshold cycle;Ct)表示,计算获得拷贝数。
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通用型细菌16S rDNA 荧光定量PCR扩增检测试剂是一种旨在运用SYBR绿色荧光染料作为标记信号,针对微生物样本DNA进行保守性序列PCR扩增,实时检测和定量分析扩增产物的技术方法。可以被用于各种样品,包括血液、体液、组织、土壤等的细菌拷贝数的定量检测。产品即到即用,性能稳定,无核酶污染,操作便捷,敏感高效,定量准确,重复性强。
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16SrRNA作为非培养依赖性标记的分子指模(fingerprinting)技术,有别于传统的选择性培养技术,用于研究微生物的分类学(phylogenetics)。核糖体RNA(ribosome RNA)存在于所有微生物体内,且结构与功能进化保留;容易分离和识别;其一级和二级结构具有高度进化保守区域(conserved region)和物种特异性可变区域(variable region);其基因序列变异非常缓慢,且不会发生平行基因转移(horizontal gene transfer)。其包括5S、16S、23S。5S信息量不够充分;23S不稳定;而微生物16SrRNA基因较为稳定,初级结构含有1500个碱基。通过引物设计,扩增产物。SYBR绿色荧光染料,作为DNA结合染料,可以和扩增子(amplican)上双链DNA的任一小沟(minor groove)结合,而发出荧光信号。根据每一循环的荧光强度来确定扩增产物的产量,并用循环阈值(threshold cycle;Ct)表示,计算获得拷贝数。